Lymphocyte subpopulations in children after allogenic stem cell transplantation

Abstract

B a c k g r o u n d. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT) is a method of treatment in a variety of diseases, which involves replacing the recipient's bone marrow by healthy donor stem cells. O b j e c t i v e. The aim of the study was the analysis of immune reconstitution in children and adolescents after allo- HSCT. P a t i e n t s a n d m e t h o d s. We analyzed lymphocyte subpopulations in 67 children after allo-HSCT for hematological malignancies and non-malignant diseases. B-cells, T-cells, NK (natural killer cells) and CD4/CD8 ratio were assayed in peripheral blood by flow cytometry using a set of antibodies CD2/CD19, CD3/CD4/CD8, CD3/CD16CD56 labeled with different fluorescent dyes. The tests were performed at 1, 3, 6, 9, 12, 15, 18 and 24 months after the HSCT. R e s u l t s. Normalization of the number of lymphocytes occurred rapidly in the population of NK cells; however, significant decrease in the proportion of NK cells was observed at 6 months after HSCT (p=0.028). The recovery of T cells occurred after 3 months for CD2 and after 6 months for CD3 cells. Within the B-cell population, a significant delay of reconstitution was observed: CD19 cell percentage exceeded 5% (p<0.001) in the ninth month after HSCT, while it was above 10% afterwards. The normalization of CD4/CD8 ratio was very slow and delayed and did not achieve normal values within 24 months after allo-HSCT. C o n c l u s i o n s. Reconstitution of the immune system in children after allo-HSCT is the fastest for NK cells. Normal values of T- and B-lymphocytes were reached after 6 and 9 months, respectively. CD4/CD8 ratio is a parameter the normalization of which requires at least two years.

W s t ę p. Przeszczepienie allogenicznych komórek krwiotwórczych (allo-HSCT) to metoda terapeutyczna polegająca na zastąpieniu szpiku kostnego biorcy przez komórki hematopoetyczne pochodzące od zdrowego dawcy. C e l. Analiza subpopulacji limfocytów u dzieci po przeszczepieniu allogenicznych komórek krwiotwórczych. P a c j e n c i i m e t o d y k a. Badaniu poddanych zostało 67 dzieci, u których przeprowadzono allo-HSCT z powodu chorób nowotworowych i nie-nowotworowych. We krwi obwodowej badano limfocyty B, T i NK oraz stosunek CD4/CD8 metodą cytometrii przepływowej, stosując zestawy przeciwciał CD2/CD19, CD3/CD4/CD8, CD3/CD16/CD56 wyznakowane różnymi barwnikami fluorescencyjnymi. Badania wykonano w 1, 3, 6, 9, 12, 15, 18 i 24 miesiącu po HSCT. Wy n i k i. Normalizacja liczby limfocytów nastąpiła najszybciej w obrębie populacji komórek NK, jednak po 6 miesiącach obserwowano znaczne zmniejszanie odsetka tych komórek (p=0,028). Normalizacja limfocytów T wystąpiła po 3 miesiącach dla CD2 i po 6 miesiącach dla CD3. W obrębie limfocytów B stwierdzono istotne opóźnienie rekonstytucji: dopiero w 9 miesiącu odsetek komórek CD19+ przekroczył 5% (p<0,001), a w kolejnych punktach czasowych wynosił powyżej 10%. Rekonstytucja odsetka CD4/CD8 była powolna i opóźniona i nie osiągnęła normalizacji w przeciągu 24 miesięcy po allo-HSCT. Wn i o s k i. Rekonstytucja układu immunologicznego u dzieci po allo-HSCT najszybciej przebiega dla komórek NK. Prawidłowe wartości limfocytów T i B osiągane są odpowiednio, po około 6 i 9 miesiącach. Stosunek CD4/CD8 jest parametrem, którego normalizacja wymaga co najmniej 2 lat.